2016年ELISA試劑盒儀器質控研究

ELISA試劑盒為使儀器保持*工作狀態應建立維護和校正儀器的標準操作程序（SOP），所要控制的儀器包括移液器（加樣槍），水浴箱（溫箱），洗板機和酶標儀。
◎移液器：ELISA加樣量小（5-100ｕl），其準確性直接影響實驗結果，利用稱重法檢查：吸取刻度指示量的水，萬分之一天平稱重后計算吸量是否準確，一般應在±10%以內；
◎水浴箱 經常檢查水浴箱溫度計所示的溫度和水中（或溫箱內）實測溫度是否一致，ELISA試劑盒允許有±1℃的誤差；
◎洗板機 每個廠家設置洗板后的殘留液有各自的規定一般不超過2ul ，人工扣板時，墊紙不濕，定期檢查管孔是否堵塞；
◎酶標儀 經常維護其光學部分，防止濾光片霉變，ELISA試劑盒定期檢測校正，使其保持良好的工作性能。
附1：ELISA試劑盒酶標儀校正程序
◎濾光片波長精度檢查：將不同波長的濾光片從酶標儀上卸下，用UV-2201型紫外-可見分光光度計（波長精度±0.3nm）于可見光區對每個濾光片進行掃描，其檢測值與標定值之差為濾光片波長精度。
◎通噵差與孔間差檢測：通道差檢測是取一只酶標板小孔杯（杯底須光滑，透明，無污染以酶標板架作載體， ELISA試劑盒將其（內含200ul甲基橙溶液吸光度調至0.500A左右）置于8個通道的相應位置，蒸溜水調零，1于490nm處連續測三次,觀察其不同通道的檢測器測量結果的一致性，可用極差值來表示。孔間差的測量是選擇同一廠家，同一批號酶標2板條（8條共96孔）分別加入200ul甲基橙溶液（吸光度調至0.100A左右）先后置于同一通道，蒸溜水調零,于490nm處檢測，其誤差大小用±1.96s衡量。
n 零點飄移（穩定性觀察）：取8只小孔杯分別置于8個通道的相應位置，均加入200ul蒸溜水并調零，于490nm處每隔30分鐘測一次，觀察各個通道4小時內吸光度的變化。
◎精密度評價：每個通道3只小杯分別加入200ul高中低3種不同．濃度的甲基橙溶解，蒸溜水調零，于490nm作雙份平行測定，每日測二次（上下午各一次），連續測定20天。分別計算其批內精密度，日內批精密度,日間精密度和總精密度及相應的CV值。
◎線性測定：用電子天平稱取甲基橙配制5個系列的溶液，于490nm平行測8次，取其均值。計算其回歸方程，相關系數及標準估計誤差s，并用±1.96s表示樣品測量的誤差范圍.ELISA試劑盒雙波長測定評價：取一分甲基橙溶液，分別加入3種不同濃度的溶血液（測定波長為490nm，校正波長為585nm），先后于8個通道檢測，每個通道測3次，比較各組之間是否具有統計學差異，以考察雙波長消除干擾組分的效果。
◎ELISA試劑盒一般酶標儀無585nm濾光片，可選用550nm或630nm濾光片。450nm 濾光片的檢定選用普魯蘭溶液（校正波長為630nm）。