ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)之試劑配置

ELISA試劑盒被廣泛運(yùn)用與各大實(shí)驗(yàn)中，其中關(guān)于實(shí)驗(yàn)中緩沖溶液等試劑的配制可能對(duì)實(shí)驗(yàn)新手來(lái)說(shuō)還是個(gè)很大的困擾。
試劑
(1) ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
NaHCO3    1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸餾水至1000ml
(2) ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液(PH7.4 PBS)：0.15M
KH2PO4   0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl   8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05%  0.5ml
加蒸餾水至1000ml
(3) ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋液：
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。
(4) ELISA實(shí)驗(yàn)終止液(2M H2SO4)：
蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
(5) ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L)              25.7ml
0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸餾水50ml。
(6) ELISA實(shí)驗(yàn)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇)   0.5ml
底物緩沖液(PH5.5)   10ml
0.75%H2O2                           32μl
(7) ELISA實(shí)驗(yàn)ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物緩沖液(PH5.5)    1ml
3%H2O2                          2μl
(8)ELISA實(shí)驗(yàn)封閉液：
牛血清白蛋白(BSA) 5克
加洗滌緩沖液至100ml。
諾泰中國(guó)提醒：為了保證ELISA實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，實(shí)驗(yàn)操作中加入的緩沖液和各組分一定要，將洗滌液加入酶標(biāo)板中的時(shí)候防止加入的試劑混入另外一個(gè)酶標(biāo)孔，嚴(yán)防交叉污染。