造成ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果不樂(lè)觀的因素

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樣品相關(guān)事宜解說(shuō)：
1、樣品的采集:
（1）血漿：將全血收集到含抗凝劑的離心試管中，采集后立即離心。
（2）血清：靜脈穿刺采集全血，待其凝血，室溫下離心獲取血清。
2、樣品的稀釋：在實(shí)驗(yàn)時(shí)，如果血清樣品中睪酮的濃度高于zui高標(biāo)準(zhǔn)品中睪酮的濃度，則應(yīng)將此樣品用零標(biāo)準(zhǔn)品稀釋10或100倍，并按實(shí)驗(yàn)步驟重新檢測(cè)，在計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)當(dāng)將此稀釋因子考慮進(jìn)去。
3、樣品的儲(chǔ)存:實(shí)驗(yàn)開始前，應(yīng)當(dāng)將樣品用蓋子蓋好，2-8℃環(huán)境下可穩(wěn)定存放5天，如果實(shí)驗(yàn)前想要將樣品存放更長(zhǎng)的時(shí)間，則應(yīng)將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下，解凍的樣品在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)反復(fù)倒置幾次。

造成ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果不樂(lè)觀的因素：
A、試劑盒沒(méi)有按規(guī)定進(jìn)行保存，受高溫影響。
B、試劑盒、樣品用前未平衡至室溫。
C、加入試劑的體積和時(shí)間有誤，移液器計(jì)量不準(zhǔn)，吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔。
D、必須在有效期內(nèi)使用，超過(guò)有效期的產(chǎn)品可能會(huì)產(chǎn)生很弱的信號(hào)。
E、孵育時(shí)間及孵育溫度未達(dá)到要求，反應(yīng)板放入培養(yǎng)箱時(shí)注意溫度并及時(shí)調(diào)整。
F、洗板及加樣過(guò)程中，酶標(biāo)受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力。
G、蒸餾水水質(zhì)有問(wèn)題。
H、洗板次數(shù)過(guò)多，或濃縮洗液稀釋倍數(shù)不符合要求，洗滌沖擊力太大，浸泡時(shí)間太長(zhǎng)。
I、顯色劑加量不足或順序顛倒，或混合后加入。

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